接下來咱們就共同嘮嘮基因工程的第二步。
上回咱們說完了基因工程的第一步,就是目的基因的獲取。接下來咱們就嘮嘮基因工程的第二步,基因表達體的構(gòu)建。這一部是基因工程的核心,也是基因工程的第二步。
對于基因表達體的構(gòu)建,我們的目的有兩個:
1使目的基因在受體中穩(wěn)定存在
2使目的基因可以遺傳給下一代
這就是基因表達體的構(gòu)建的目的。
之后,既然談到了基因表達載體,那么咱們就來看看基因表達體是由什么組成的。
基因表達載體是通過啟動子+目的基因+標(biāo)記基因+終止子組成的。
啟動子的實質(zhì)就是我們前面說的引物,他的目的就是被RNA聚合酶識別,這樣就可以在生物體內(nèi)進行轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程了。從而產(chǎn)生我們所需要的蛋白質(zhì),或者是相對的性狀。
目的基因?qū)嵸|(zhì)就是我們需要表達的基因,也就是這個基因表達載體的主體成分。
標(biāo)記基因就是為了我們后續(xù)的鑒別受體細胞中是否含有目的基因的一種相當(dāng)于熒光標(biāo)記,可以及時的讓我們發(fā)現(xiàn)目的基因的存在。
終止子,顧名思義,它的目的就是讓轉(zhuǎn)錄進行停止,實質(zhì)就是終止密碼子。
這就是基因工程的第二步操作,基因表達載體的構(gòu)建。
之后咱們就進入基因工程的第三步過程,將目的基因?qū)胧荏w細胞中。
在此之前,我們要提出一個概念,叫做轉(zhuǎn)化。在基因工程中,我們的特有名詞轉(zhuǎn)化指的是目的基因進受體細胞,并在受體細胞內(nèi)穩(wěn)定存在與表達的過程,這個過程就叫做轉(zhuǎn)化。
那么我們的轉(zhuǎn)化方法有什么呢?正可謂是:物以類聚,人以類分。
所以我們要根據(jù)生物種類的不同而采用不同的轉(zhuǎn)化方法。
對于動物而言,我們需要采用顯微注射技術(shù)。
什么是顯微注射技術(shù)呢?所謂顯微注射技術(shù),就是指在顯微鏡下,通過人工方法向動物細胞內(nèi)進行注射我們的目的基因,也就是基因表達載體。
在這里我們需要使用現(xiàn)代的儀器,顯微注射儀將目的基因注入到細胞中,并且還需要將細胞置于子宮內(nèi)培養(yǎng),否則它難以形成鮮活的個體。
對于微生物而言,我們通常采用鈣離子處理法。
鈣離子處理法就是利用了微生物對鈣離子吸收這一過程的現(xiàn)象,而采用的一種技術(shù)方法。
這種技術(shù)方法就是用鈣離子處理細胞,讓細胞可向細胞內(nèi)吸收鈣離子的狀態(tài)。
這種狀態(tài)也叫感受態(tài),這種細胞就叫做感受態(tài)細胞。之后我們再向這個溶液中注入DNA分子,讓其吸收。
買二贈一,既然說完了基因工程的第二步和第三步操作,那么我們順便來談一談基因工程的最后一步。
基因工程的最后一步也是進工程的第四步(小編比較細心,害怕漢字不認識>_<¦¦¦,其實是按照,特定的敘述方式進行敘述的,請多多見諒!)
基因工程的第四步是:目的基因基因的檢測與鑒定。這一步也是很重要的一步,也是非常不可或缺的。
因為它可以檢查基因工程是否成功,如果成功,需要記錄數(shù)據(jù),如果不成功,還需要重新做實驗,所以這一步,必不可少。
對于目的基因的檢測與鑒定的方法有:DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)、抗原―抗體雜交技術(shù)、個體生物學(xué)水平鑒定如接種實驗等。
在這里,這些雜交技術(shù)都是需要進行的,并且是按照這個順序從上至下依次進行的。每一個技術(shù)都是不能缺少的,這是逐步檢測DNA是否復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、表達的流程。
DNA分子雜交技術(shù)就是將含目的基因的DNA片段,用同位素標(biāo)記作為探針,讓探針和基因組DNA雜交,如果有雜交帶,那么就有目的基因進入染色體當(dāng)中。反之,則沒有。沒有,就需要重新做實驗。
分子雜交技術(shù)是指檢測mRNA是否存在目的基因的遺傳片段。具體的操作是:在生物體內(nèi)提取mRNA用已經(jīng)標(biāo)記的目的基因,作為探針與mRNA雜交,如果出現(xiàn)雜交帶,那么說明有此類mRNA產(chǎn)生。反之,和上述一樣。所以就不多說了。
抗原―抗體雜交技術(shù)是從受體的生物體中提取蛋白質(zhì)與相應(yīng)的抗體結(jié)合,如果出現(xiàn)雜交代,那么就會有蛋白質(zhì)產(chǎn)品的生成。反之,一樣。
對于個體生物學(xué)水平鑒定,我們就簡單的了解最基礎(chǔ)的接種實驗。
接種實驗就是指將生物學(xué)與天然生物對比,對其接種改變的性狀,觀察看看是否此類性狀。這就是接種實驗。
好了,話不多說了,這就是今天的全部內(nèi)容,買二贈一,你怎么看?⊙ω⊙
![](https://ccstatic-1252317822.file.myqcloud.com/portraitimg/2020-03-24/5e798d09267e9.jpeg)
采曉天
其實沒有什么想說的,單純就是冒個泡*^◎^*